地西他滨逆转脾酪氨酸激酶DNA启动子甲基化在肺癌中的作用
2022-04-19 09:52:09 来源: 长沙肿瘤 咨询医生
地西他滨逆转脾酪氨酸激酶DNA启动子甲基化在肺癌中的作用
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摘要:研究中非小细胞肺癌细胞株NL9980、L9981、A549和YTMLC-9中有甲基化存在,当使用地西他滨后,Syk重新表达。
目的
肺癌是人类发病率和死亡率最高的恶性 ,Syk是重要的抑癌基因,DNA启动子甲基化是影响抑癌基因失活的重要机制,该机制可被地西他滨逆转,我们拟探讨地西他滨对肺癌Syk表达的影响。本研究旨在探讨地西他滨逆转脾酪氨酸激酶DNA启动子甲基化在肺癌中的作用。
研究方法
免疫组织化学
DNA提取、纯化、重亚 盐修饰和甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)
RNA提取、反转录、实时荧光定量反转录聚合酶链反应(VQ-PCR)
地西他滨逆转DNA启动子甲基化
结果
1.Syk蛋白表达:Syk在癌组织和癌旁组织中的表达不同。在癌旁组织,Sykc-20在胞质可见,被染为土黄色,而这种现象在癌组织中未见。
2.Syk肺癌细胞株中的表达:5种肺癌细胞株的Syk表达水平均低于阳性对照和阴性对照组(P<0.05),5种肺癌细胞株中Syk的mRNA表达均缺失。
3.肺癌细胞株Syk启动子甲基化检测:NL9980、L9981、A549和YTMLC-9存在启动子甲基化,NCI-H446未见。
4.地西他滨逆转甲基化与Syk再表达:NL9980、L9981、A549、YTMLC-9SykmRNA表达明显升高(P<0.05),NCI-H446表达水平较前差异无统计学意义(P>0.05)。
结论
本研究结果表明Syk表达缺失与恶性 的发生相关。研究中非小细胞肺癌细胞株NL9980、L9981、A549和YTMLC-9中有甲基化存在,当使用地西他滨后,Syk重新表达。而细胞株NCI-H446中虽然存在Syk表达的缺失,但并没有在它的启动子区发现甲基化现象存在,究其原因需要进一步研究。
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